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                熱線電話: 400-888-3135

                Gastric Carcinoma Organoid Medium
                胃癌3D類器官培養基 PRS-GCM-3D

                產品品牌:PRECEDO
                產品貨號:PRS-GCM-3D
                產品規格:100ml 500ml
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                產品介紹

                產品說明胃癌3D類器官培養基(Gastric Carcinoma Organoid Medium)是一種為促進人源胃癌類器官體外形成和擴增而開發的培養基。它是一種無菌的液體混合系統,含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物、生長因子、微量礦物質等。該培養基的獨特配方可以提供一個最佳人源胃癌類器官體外培養環境,選擇性地促進體外人源胃癌類器官的生長。
                產品優勢

                (1) 培養成功率高

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                ▲胃癌類器官鏡下明場照片

                (2) 體外持續擴增

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                ▲胃癌類器官生長曲線

                (3) 保持腫瘤特征

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                ▲胃癌類器官熒光照片

                (4) 藥敏結果與臨床數據接近

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                ▲胃癌類器官藥敏結果

                使用說明:
                實驗前準備
                1)15mL無菌離心管、1.5mL離心管、24孔細胞培養板、移液器、移液管、無菌槍頭等表面消毒后放入生物安全柜中紫外照射30min。
                2)提前30min4℃冰箱取出胃癌類器官培養基平衡至室溫,提前1h-20℃冰箱取出所需體積的基質膠冰上融化。
                胃癌類器官培養
                1)將獲取的胃癌原代細胞懸液計數,根據計算好的體積吸取細胞懸液加入預冷的1.5 mL離心管中。
                2)補齊預冷的培養基至所需體積,將預冷后的細胞懸液加入等體積的基質膠中輕輕混勻(全程冰上操作),使得胃癌原代細胞終濃度為5×106個細胞/毫升。
                3)然后將細胞與基質膠的混合液按照50μL/孔呈半球形點膠于24孔板。
                4)將培養板放入5%CO2 37 ℃培養箱中30min,待基質膠完全凝固。
                5)沿孔壁每孔緩慢加入500μL預先恢復至室溫的類器官培養基,置5%CO2 37℃培養箱培養。
                6)3天后鏡下觀察類器官形成情況,粒徑大于30~50μm即認為類器官已經形成,每3天更換一次培養基進行培養,持續觀察類器官大小,鏡下觀察大部分類器官大小均大于30~50μm且大小不再增大即可收集類器官進行后續實驗。
                胃癌類器官收集
                1)棄培養基,每孔加入200μL基質膠解離試劑,室溫放置1min。

                2)輕輕吹打混勻,收集至15mL離心管中,50rpm恒溫震蕩解離10-20min,解離之后1500rpm離心3 min,輕輕吸去上清,待用。
                胃癌類器官傳代
                1)收集的類器官,加入適量的消化酶,37℃,200rpm消化(具體時間根據類器官大小和數量決定,以肉眼可見顆粒明顯減小一半為準,可中間取消化的類器官顯微鏡觀察,類器官消化至3~10個細胞集合體最佳)。

                2)消化完全后1500rpm離心3min,棄上清,使用清洗液重懸后1500rpm離心3min。
                3)加入預冷的胃癌類器官培養基進行重懸,計數,按照培養步驟操作繼續培養。
                注意事項:
                1.本產品在使用前需平衡至室溫。
                2.樣本需為腫瘤組織,且腫瘤細胞比例越高(>50%),類器官培養成功率越高;
                3.使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
                4.為保持本產品的愚佳使用效果,不宣將其過夜放置于室溫或較高的溫度環境中。

                5.類器官培養過程要輕柔,避免基質膠凝固后散膠。
                6.請于保質期內使用本產品,超出保質期,必須放棄使用。
                7.本產品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。


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