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                熱線電話: 400-888-3135

                Esophagus Carcinoma Organoid Medium
                食管癌3D類器官培養基 PRS-ECM-3D

                產品品牌:PRECEDO
                產品貨號:PRS-ECM-3D
                產品規格:100ml 500ml
                產品價格:咨詢
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                產品介紹

                產品說明食管癌3D類器官培養基(ESophaqus Carcinoma Organoid Medium)是一種為促進食管鱗癌類器官體外形成和擴增而設計的培養基。它是一種無菌的液體混合系統,含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質等。該培養基的獨特配方可以提供一個最適的食管鱗癌類器官擴增所需營養環境,選擇性地促進體外人食管鱗癌類器官的生長。

                產品優勢
                (1) 培養成功率高

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                ▲食管癌類器官鏡下明場照片

                (2) 體外持續擴增

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                ▲食管癌類器官生長曲線

                (3) 保持腫瘤特征

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                ▲食管癌類器官熒光照片

                (4) 藥敏結果與臨床數據接近

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                ▲食管癌類器官藥敏結果

                使用說明:

                實驗前準備
                (1)消化好的食管癌原代細胞懸液。
                (2)15mL無菌離心管、1.5mL離心管、24孔細胞培養板、移液器、移液管、無菌槍頭等表面消毒后放入超凈工作臺中紫外照射30 min。
                (3)提前30 min4℃冰箱取出食管癌類器官培養基平衡至室溫,提前從-20℃冰箱取出所需體積的基質膠冰上融化。

                食管癌類器官培養
                (1)將消化好的食管癌細胞懸液計數,按照1-2萬細胞每孔計算所需的細胞數,根據計算好的體積吸取細胞懸液加入預冷的1.5mL離心管中,補齊預冷的DMEM/F12至所需體積。
                (2)將預冷后的細胞懸液加入等體積的基質膠中輕輕混勻(全程冰上操作),然后將細胞與基質膠的混合液按照40μL/孔接種于24孔板。
                (3)將接種好的培養板放入培養箱至少30 min,待基質膠完全凝固,然后沿24孔壁每孔緩慢加入500μL預先恢復至室溫的類器官培養基,3天后鏡下觀察類器官形成情況,粒徑大于50μm即認為類器官已經形成。
                (4)每5天更換一次培養基進行培養,持續觀察類器官大小,鏡下觀察大部分類器官大小均大于50μm且大小不再增大即可收集類器官進行后續實驗。

                食管癌類器官收集
                (1)吸去培養基,每孔加入
                200μL基質膠解離試劑,輕輕吹打混勻,收集至15mL離心管中。
                (2)37℃解離30min(具體解離時間根據實際情況決定,以無明顯大塊膠狀物為準),解離之后1500rpm離心3min,輕輕吸去上清,待用。

                食管癌類器官傳代
                (1)解離之后的細胞加入適量的消化酶,
                37℃,200rpm消化(具體時間根據類器官大小和數量決定,以無肉眼可見顆粒為準)。
                (2)消化完全后1500rpm離心3min,輕輕吸去上清,使用終止培養基重懸后1500rpm離心3min,加入預冷的DMEM/F12培養基進行重懸,計數,按照培養步驟操作繼續培養。

                注意事項:
                1.本產品在使用前需平衡至室溫。
                2.使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
                3.為保持本產品的最佳使用效果,不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環境中。

                4.請于保質期內使用本產品,超出保質期,必須放棄使用。
                5.樣本需為食管鱗癌術中樣本,且腫瘤細胞比例越高(至少>50%),培養成功率越高,不推薦用于少量樣本(如內鏡或者循環腫瘤細胞)的培養。
                6.本產品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。


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