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                熱線電話: 400-888-3135

                Breast Carcinoma Organoid Medium
                乳腺癌3D類器官培養基 PRS-BCM-3D

                產品品牌:PRECEDO
                產品貨號:PRS-BCM-3D
                產品規格:100ml 500ml
                產品價格:咨詢
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                產品介紹

                產品說明乳腺癌3D類器官培養基(Breast Carcinoma Organoid Medium)是一款促進乳腺癌類器官體外形成和擴增的培養基。該產品為無菌的液體混合系統,含有維持目的細胞生長所必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物和生長因子等。該培養基的獨特配方可以提供一個合適的細胞所需營養環境,選擇性地促進人乳腺癌類器官的體外生長和擴增。
                產品優勢
                (1) 培養成功率高

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                ▲乳腺癌類器官鏡下明場照片


                (2) 體外持續擴增

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                ▲乳腺癌類器官生長曲線

                (3) 保持腫瘤特征

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                ▲乳腺癌類器官熒光照片

                (4) 藥敏結果與臨床數據接近

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                ▲乳腺癌類器官藥敏結果

                使用說明:
                實驗前準備
                1)提前將24孔細胞培養板置于37℃的培養箱中預熱過夜。
                2)將15mL無菌離心管、1.5mLEP管、移液器、移液管、無菌槍頭等表面消毒后放入超凈工作臺中紫外照射30min。
                3)提前30min4 ℃冰箱取出乳腺癌類器官培養基平衡至室溫。

                (4)提前從-20℃冰箱取出所需體積的細胞外基質膠冰上融化。

                (5)配置含1%BSADMEM培養基冰上預冷備用。
                乳腺癌類器官培養
                1)將取自乳腺癌患者的樣本進行分離和消化,消化后的細胞懸液進行計數。
                2)按每孔1~2×104個細胞密度計算所需細胞數,根據計算好的體積吸取細胞懸液加入預冷的1.5mL離心管中,離心,棄上清,將細胞沉淀置于冰上。
                3)按1∶2體積比,將一份體積的含1%BSADMEM加入2份體積的的細胞外基質膠中,輕輕混勻(全程冰上操作),然后在冰上將配好的基質膠混合液與細胞沉淀充分混勻。
                4)將細胞沉淀與基質膠的混合液按照35μL/孔滴在已提前預熱好的24孔板中央,使之形成圓頂狀膠滴。緩慢將細胞培養板移至培養箱至少30分鐘。
                5)待基質膠完全凝固,沿24孔壁緩慢加入1mL/孔預先恢復至室溫的本類器官培養基,并將培養板置于37℃,5%CO2條件下靜置培養。
                6)鏡下觀察類器官形成情況,每3~4天更換一次培養基。
                乳腺癌類器官收集
                1)棄去培養基,用基質膠解離試劑潤洗槍頭后,每孔加入1mL該試劑,靜置1min。

                2)用基質膠解離試劑潤洗槍頭后,吸取孔內液體,輕輕吹打圓頂狀膠滴表面,將膠滴吹散,并將吹散后的含類器官的混合液收集至15mL離心管中。
                3)重復一次上述操作,將兩次洗脫下來的類器官合并收集于同一15mL離心管中。
                4)37℃,75rpm水平搖床上解離10min(具體解離時間根據實際情況決定,以無明顯大塊膠狀物為準)。
                5)10分鐘后在4℃下,300g,離心5min,小心吸棄上清,沉淀待用。
                乳腺癌類器官傳代
                1)收集好的細胞沉淀(以無肉眼可見基質膠狀沉淀為準)加入預冷的含1%BSA的DMEM培養基重懸,在4℃下,300g,離心5min。

                2)小心吸棄上清,沉淀用含1%BSADMEM培養基重懸計數。
                3)按照培養步驟操作,以大約1000個類器官/孔密度重新接種類器官,繼續擴大培養。
                注意事項:
                1.本產品在使用前需平衡至室溫。
                2.使用產品時應注意無菌操作,避免污染。
                3.本產品中不含血清,含有抗生素,如無特別需要,不用額外添加血清和其他抗生素,可直接使用。
                4.為保持本產品的最佳使用效果,不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環境中。

                5.請于保質期內使用本產品,超出保質期后,將無法達到理想的使用效果。
                6.乳腺組織樣本建議為腫瘤術中樣本,且腫瘤細胞比例越高(至少>50%),培養成功率越高,不推薦用于少量樣本(如穿刺或循環腫瘤細胞)的培養。
                7.本產品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。


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